Xét nghiệm này được sử dụng để phát hiện phơi nhiễm nicotine thông qua việc định lượng nicotine và chất chuyển hóa chính của nó là cotinine trong các mẫu sinh học. Nicotine có thời gian bán thải tương đối ngắn, khoảng 1–2 giờ, do đó chỉ có thể phát hiện trong một khoảng thời gian ngắn sau khi phơi nhiễm. Ngược lại, cotinine có thời gian bán thải dài hơn nhiều, khoảng 16–20 giờ, cho phép phát hiện trong vòng tối đa 7 ngày sau khi sử dụng nicotine (tùy thuộc vào mức độ và tần suất hút thuốc). Vì vậy, cotinine được xem là dấu ấn sinh học ưu tiên để phân biệt người hút thuốc chủ động với người không hút thuốc, và để đánh giá việc sử dụng thuốc lá gần đây, cũng như xác định mức độ phơi nhiễm với khói thuốc thụ động.
Nicotine là một alkaloid có nguồn gốc tự nhiên, có trong các sản phẩm thuốc lá như thuốc lá điếu, xì gà, thuốc lá tẩu, thuốc lá nhai và các sản phẩm khác có chứa nicotine. Trong quá trình hút thuốc, sự đốt cháy thuốc lá tạo ra hàng nghìn hợp chất hóa học, trong đó có nhiều chất độc hại, bao gồm cả nicotine. Nicotine được hấp thu nhanh qua phổi và niêm mạc, và nhanh chóng xâm nhập đến não trong vòng 10–20 giây, gây kích thích hệ thần kinh trung ương và góp phần gây lệ thuộc nicotine cùng các tác động sinh lý khác.




